صبغة جرام ، أو مجرد جرام ، هي تقنية سريعة وبسيطة تهدف إلى تمييز البكتيريا وفقًا لخصائص جدارها الخلوي بعد التعرض للأصباغ والحلول المختلفة.
وبالتالي ، عن طريق صبغ الجرام ، من الممكن التحقق ، بالإضافة إلى شكل البكتيريا ، من اللون الذي تكتسبه ، وهذه النتيجة مهمة لتحديد استراتيجيات أخرى للتعرف على الأنواع البكتيرية ولكي يوضح الطبيب العلاج الوقائي حسب الخصائص المرصودة مجهريا.
عادةً ما يتم إجراء تلطيخ الجرام بشكل روتيني في المختبر وهو جزء من اختبار تنظير البكتيريا. افهم ما هو التنظير البكتيري وكيف يتم ذلك.
كيف يتم صبغ غرام
صبغة جرام هي طريقة سريعة وعملية وغير مكلفة لتحديد البكتيريا المسؤولة عن العدوى ، وهي مفيدة للأطباء للإشارة إلى العلاج الوقائي للعدوى التي قد تحدث ، حيث أن الخصائص المحددة لهذه المجموعات من البكتيريا معروفة ،
يتم تلوين غرام في 7 خطوات رئيسية ، ومع ذلك قد يختلف البروتوكول اعتمادًا على المختبر:
- ضع بعض مستعمرات البكتيريا على الشريحة مع إضافة قطرة ماء لتسهيل تجانس المستعمرات ؛
- اتركه يجف قليلاً ، ويمكن للشفرة أن تمر بسرعة عبر اللهب لتفضيل التجفيف ، ولكن من المهم الانتباه إلى درجة الحرارة ، لأنه إذا كانت درجة الحرارة مرتفعة جدًا ، فمن الممكن أن يكون هناك تغيير في بنية البكتيريا ، مما قد يتداخل مع النتيجة الامتحان؛
- عندما تجف الشريحة ، قم بتغطيتها بصبغة الكريستال البنفسجي واتركها تعمل لمدة دقيقة تقريبًا ؛
- اغسل الشريحة بتيار من الماء الجاري وقم بتغطية الشريحة باللوجول ، والتي تهدف إلى تثبيت الصبغة الزرقاء ، واتركها تعمل لمدة دقيقة واحدة. يمكن أن يمتص كلا النوعين من البكتيريا المركب المتكون من الصبغة واللوغول ، ويتحول إلى اللون الأزرق ؛
- ثم اغسل الشريحة بالماء الجاري واستخدم 95٪ كحول ، واتركها تعمل لمدة 30 ثانية. الكحول مسؤول عن إذابة الغشاء الدهني الذي يشكل البكتيريا سالبة الجرام ، وبالتالي إزالة المركب المتكون بين الصبغة واللوغول ، مما يؤدي إلى تغيير لون هذه البكتيريا. ومع ذلك ، في حالة البكتيريا موجبة الجرام ، يعمل الكحول على تجفيف جدار الخلية من البكتيريا موجبة الجرام ، مما يتسبب في تقلص المسام وجعلها غير منفذة ؛
- ثم اغسل بالماء الجاري مرة أخرى وقم بتغطية الشريحة بالصبغة الثانية ، fuchsin أو safranin واتركها تعمل لمدة 30 ثانية ؛
- ثم اغسل الشريحة تحت الماء الجاري واتركها تجف في درجة حرارة الغرفة.
بمجرد أن تجف الشريحة ، يمكن وضع قطرة من زيت الغمر ومراقبة الشريحة تحت المجهر بهدف 100x ، حيث يمكن التحقق من وجود أو عدم وجود البكتيريا ، وكذلك وجود الخمائر والخلايا الظهارية.
لما هذا
الهدف الرئيسي من تلوين غرام هو تمييز البكتيريا وفقًا لخصائص جدار الخلية والتشكل العام. وبالتالي ، وفقًا للخصائص الملاحظة تحت المجهر ، يمكن تصنيف البكتيريا إلى:
- البكتيريا موجبة الجرام ، والتي تظهر بلون أزرق بسبب حقيقة أنها لا يتغير لونها بسبب الكحول ، لأن لها جدار خلوي أكثر سمكًا وتضيق مسامها عند تعرضها للوغول ؛
- البكتيريا سالبة الجرام ، والتي تظهر بلون وردي / أرجواني بسبب حقيقة أنها تغير لونها بسبب الكحول وملطخة بالسافران أو الفوشسين.
بعد تصوير البكتيريا تحت المجهر ، من الممكن إجراء اختبارات أخرى في المختبر لتحديد نوع البكتيريا. ومع ذلك ، من خلال الجرام والارتباط بالعلامات والأعراض التي يقدمها الشخص ، يمكن للطبيب أن يشير إلى علاج وقائي حتى تتوفر نتيجة فحوصات أكثر تحديدًا ، حيث يمكن بهذه الطريقة تقليل معدل تكاثر البكتيريا ومنع حدوث مضاعفات.